酵母双杂交系统广泛应用于研究蛋白质相互作用的实验方法。二缺、三缺和四缺等系列酵母突变体是双杂交系统中常用的工具，它们在实验中的作用如下：

    二缺突变体：指同时缺失两个关键基因（trp和his）的酵母菌株。二缺突变体需要在培养基中添加酪氨酸（tryptophan）和组氨酸（histidine）才能生长。该突变体被用于筛选蛋白质相互作用伙伴时，可以通过两个缺陷的共同存在限制误报，提高筛选的特异性。

    三缺突变体：指同时缺失三个关键基因（trp、his和ade）的酵母菌株。三缺突变体会产生一定的胞外酶类物质，通常需要在培养基中添加酪氨酸、组氨酸和腺嘌呤（adenine）才能生长。该突变体在筛选蛋白质相互作用伙伴时，可以进一步排除假阳性结果，提高筛选的准确性。

    四缺突变体：指同时缺失四个关键基因（trp、his、ade和lys）的酵母菌株。四缺突变体需要在培养基中添加酪氨酸、组氨酸、腺嘌呤和赖氨酸（lysine）才能生长。该突变体被用于筛选具有更强互作力的蛋白质复合物，或进行定量测定相互作用强度的实验。

    酵母双杂交二缺、三缺和四缺突变体的引入可以增加筛选蛋白质相互作用伙伴的准确性和特异性，降低假阳性结果的可能性，同时还可以进一步探究蛋白质复合物的组成和相互作用强度等问题。