抗体制备一般流程
抗体制备的一般流程包括以下步骤:
免疫原制备:首先需要准备用于免疫动物的抗原。通常可以是蛋白质、多肽或者多糖等,也可以是细胞组织、细胞培养上清液等。免疫原需要经过纯化和检测确保纯度和质量。
动物实验和免疫:将动物注射含有免疫原的佐剂后,等待免疫反应发生。通常情况下,需要注意选取合适的动物品种、注射剂量和免疫时间等因素。
收集血清并分离血清中的IgG:通常在免疫完成后,通过静脉采集动物的血液,离心收集血清。然后,可以使用不同的技术来分离出血清中的含有特异性抗体的IgG,如硫酸铵沉淀、蛋白A/G柱层析等。
抗体纯化和鉴定:分离出的IgG抗体可以通过各种方法进一步纯化,比如亲和层析,电泳等方法。商业化抗体制备程序中,通常利用高效的纯化技术和经过多重鉴定的质量控制手段保证抗体的质量一致性。
抗体应用:制备好的抗体可以用于不同的应用,如Western blotting、ELISA、免疫组织化学等。
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