双荧光素酶实验用于检测基因转录水平的变化。在该实验中，通常使用基因操纵技术将荧光素酶（Luciferase）和重组酯酶（Renilla luciferase）基因插入到感兴趣的基因启动子区域中，然后通过检测这两种荧光素酶的活性来确定基因的转录水平。

    在实验中，先加入重组酯酶底物，如coelenterazine，使其与重组酯酶发生反应，产生荧光信号。然后再加入荧光素酶底物，如luciferin，使其与荧光素酶发生反应，产生另一种荧光信号。通过检测这两种荧光素酶的信号强度比值，可以确定基因的转录水平。

    一般情况下，实验中先加入重组酯酶底物，再加入荧光素酶底物，这是因为重组酯酶的半衰期较短，需要尽快进行检测，而荧光素酶的半衰期较长，可以等待重组酯酶检测完毕后再加入。

    因此，在双荧光素酶实验中，先加入REN后加LUC是一种常用的操作顺序。但需要注意的是，具体实验操作顺序还需根据实验设计和样品特点进行优化和调整。